Как повысить эффективность колонки для ВЭЖХ

Как повысить эффективность колонки для ВЭЖХ?

Эффективность хроматографической колонки является важным показателем для оценки хроматографических характеристик. Возможность разделения смеси в хроматографической колонке зависит не только от выбора соответствующей стационарной фазы, но также от рабочих условий хроматографии и состояния заполнения хроматографической колонки. При определенных хроматографических рабочих условиях эффективность хроматографической колонки может быть измерена количеством теоретических тарелок или высотой теоретических тарелок. Чем больше количество тарелок или чем меньше высота тарелки, тем выше эффективность разделения хроматографической колонки. Сегодня Lab-Support обсудит, как повысить эффективность колонки для ВЭЖХ.

Для повышения эффективности жидкостной хроматографии можно начать со следующих аспектов.

1. Методы повышения эффективности колонки ВЭЖХ

Уменьшите расход подвижной фазы, но время анализа увеличится.
Уменьшите количество стационарной фазы, но также уменьшается нагрузка пробы на хроматографическую колонку.

Уменьшите размер частиц неподвижной фазы, но не слишком сильно, проницаемость хроматографической колонки также может уменьшится.
Подвижная фаза с низкой вязкостью используется для облегчения быстрого массопереноса, но не способствует многокомпонентному анализу.

Надлежащее повышение температуры колонки может снизить вязкость подвижной фазы, но эффективность и разрешение колонки также уменьшатся.
Сведите к минимуму мертвый объем подвижной фазы, но скорость потока подвижной фазы увеличится.

Многие факторы взаимосвязаны и ограничены в процессе хроматографического анализа. Только благодаря отслеживанию и расчету значения эффективности колонки, а также постоянным исследованиям и применению наших собственных методов анализа мы можем найти наилучшие условия работы.

2. Проблемы, на которые следует обратить внимание при отслеживании и расчете значения эффективности колонки ВЭЖХ

Мы также должны помнить, что значений эффективности колонки недостаточно для прогнозирования производительности во всех условиях. Для большинства хроматографов производительность колонки относится к способности колонки использоваться для определенного разделения, и сама по себе высокая эффективность не гарантирует эту способность к разделению.

Независимо от конкретного используемого метода испытаний существует несколько параметров, влияющих на определение эффективности колонки. Эти параметры включают состав и вязкость элюента и его линейную скорость потока, растворенное вещество, используемое для определения количества тарелок, температуру, длину колонки, метод упаковки, размер частиц, а также выбранный метод измерения и расчета. Методы измерения и расчета играют большую роль в определении значения эффективности колонны.

3. Несколько методов измерения и расчета эффективности колонки для ВЭЖХ

Поскольку хроматографический пик представляет собой распределение полос образца, полученное в предположении, что концентрация образца нормально распределяется в подвижной и неподвижной фазах, форму хроматографического пика часто рассматривают как нормальную кривую для расчета числа теоретических тарелок. Поэтому формулу для расчета КПД колонки (в единицах теоретического числа тарелок n) принято определять как N в зависимости от типа, свойств (размер частиц, гранулометрический состав и др.) неподвижной фазы, условий насадки колонки, типа и расхода подвижной фазы, а также свойств веществ, используемых для измерения эффективности колонки.

Если хроматографический пик действительно хороший, то каждый метод расчета даст один и тот же результат. Однако даже с идеальными приборами и растворенными веществами, которые имеют тенденцию давать симметричные пики, ненормальные пики могут возникать из-за щелей или пустот в колонке. Следовательно, разные методы расчета приведут к разным значениям n.

Во многих случаях хроматографам требуется значение эффективности колонки, отражающее форму пика в целом (включая хвост), и для обеспечения количественной воспроизводимости также требуется симметрия хроматографического пика. В настоящее время метод расчета наиболее чувствителен к асимметрии хроматографического пика. Если целью является просто мониторинг производительности колонки с момента ее первоначального использования до конца срока службы, подойдет любой из вышеперечисленных методов, и следует выбрать самый простой из них.

Безусловно, чтобы получить хорошие и правильные хроматограммы с разделенными пиками, немаловажно выбирать качественные колонки с походящим сорбентом, размером пор и другими характеристиками. Поставщик Lab-Support рад предоставить широчайший выбор колонок для ВЭЖХ.